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iTRAQ（isobaric tags for relative and absolute quantitation）

iTRAQ（isobaric tags for relative and absolute quantitation）技術(shù)是一種多肽體外標記技術(shù)。該技術(shù)采用4-plex或8-plex同位素的標簽，通過特異性標記多肽的氨基基團，進行LC-MS/MS分析，可同時比較多種不同樣本中蛋白質(zhì)的相對表達含量。??????????????

技術(shù)原理

應(yīng)用領(lǐng)域

技術(shù)優(yōu)勢

各種脅迫、生理、病理條件下細胞、組織樣品中高通量蛋白表達譜分析
各種物種的蛋白質(zhì)組草圖的構(gòu)建

實驗流程??

iTRAQ 可于一次實驗中同時標記 4 至 8 個的樣品，操作簡單快速，減少多次質(zhì)譜檢測中產(chǎn)生的系統(tǒng)誤差。適用于對多個樣品進行高通量的檢測，實驗設(shè)計更加靈活。
iTRAQ 是在肽段水平上進行的體外標記，幾乎適用于所有類型的生物樣本。
重現(xiàn)性好、靈敏度高、定性與定量可同時進行。
檢測限低，可檢測出低豐度蛋白。

iTRAQ試劑包括3個部分：報告基團（report group）、平衡基團（balance group）和肽反應(yīng)基團（amine-specific reactive group）。報告基團相對分子質(zhì)量為113-121Da(無120)，因此iTRAQ 試劑可同時標記8 組樣品。平衡基團相對分子質(zhì)量為192-184Da(無185)，使得八種iTRAQ試劑分子量均為305Da，保證標記的同一肽段m/z 相同。肽反應(yīng)基團將iTRAQ試劑與肽段上賴氨酸及N端氨基酸殘基相連，在其上報告基團通過平衡基團與反應(yīng)基團相連，形成等量異位標簽。

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